
Sigma-Aldrich Supelco® SPE小柱在復雜生物樣本前處理中的技術革新
內容簡介: 本文深入探討了在藥物代謝動力學、環境分析和食品安全檢測中,對復雜生物基質(如血漿、尿液、組織勻漿)進行高效凈化和富集的目標分析物前處理技術。文章詳細解析了Sigma-Aldrich旗下Supelco®固相萃取(SPE)小柱的填料化學(如C18、HLB、離子交換)、柱床結構設計以及其如何通過選擇性吸附與洗脫,有效去除磷脂、蛋白質等干擾物質,顯著提高LC-MS/MS分析的靈敏度、準確度和重現性。
關鍵詞: 固相萃取、生物樣本前處理、基質效應、LC-MS/MS、選擇性富集
正文:
在現代分析化學,尤其是基于液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)的超微量定量分析中,樣本前處理是決定整個分析方法成敗的基石。生物樣本(如血漿、血清、尿液)中含有大量蛋白質、磷脂、鹽類和各種內源性代謝物,這些基質成分不僅會污染色譜柱和離子源,更會產生嚴重的離子抑制或增強效應(基質效應),嚴重影響目標分析物(如藥物及其代謝物、生物標志物)的離子化效率,導致定量結果失真。因此,發展高效、選擇性的樣本前處理技術至關重要。Sigma-Aldrich旗下Supelco®品牌的固相萃取(Solid-Phase Extraction, SPE)小柱,憑借其種類繁多的填料化學和柱體設計,成為了應對這一挑戰的解決方案。
Supelco® SPE小柱的核心在于其精密設計的固定相填料。針對不同性質的目標分析物和基質干擾物,其提供了堪稱“百科全書"式的選擇:
反相填料(如C18, C8, C4): 基于疏水相互作用,適用于萃取中等極性至非極性的化合物。新型的混合型反相填料,如Oasis HLB(親水-親脂平衡聚合物),兼具反相和弱陰離子交換基團,具有更高的載樣量和更好的水浸潤性,無需像傳統硅膠基C18那樣預先用有機溶劑活化,簡化了操作,尤其擅長從水樣中高效捕獲多種極性的藥物分子。
離子交換填料(如SCX, SAX, WCX, WAX): 基于目標分析物與填料表面帶電基團之間的靜電相互作用,專門用于選擇性萃取帶電荷的化合物(如酸性或堿性藥物)。通過精確控制上樣和洗脫緩沖液的pH值和離子強度,可以實現選擇性純化。
專用填料: 例如專門用于去除樣品中磷脂的磷脂去除(Phospholipid Removal)小柱,其填料表面經過特殊修飾,能特異性捕獲磷脂分子,從而極大降低LC-MS/MS分析中的離子抑制效應,提高數據質量。
除了填料化學,小柱的物理結構同樣經過優化。均勻的填料裝填確保了流動通道的一致性,避免了溝流(Channeling)現象,保證了樣品與填料相互作用的均一性和重現性。惰性的聚丙烯柱體和燒結聚乙烯篩板確保了與各種溶劑的兼容性,且無提取物溶出。
其標準操作流程(活化、上樣、淋洗、洗脫)為分析人員提供了一個高度靈活且可定制的純化平臺。在藥代動力學(PK)研究中,利用Supelco® HLB小柱處理血漿樣本,可以有效地將藥物分子及其代謝物從蛋白質和磷脂中分離出來,富集并轉移至潔凈的洗脫液中。經過此步驟處理的樣品,在進行LC-MS/MS分析時,色譜圖基線更平穩,目標峰形更尖銳,基質效應被顯著抑制,從而能夠實現皮克每毫升(pg/mL)甚至飛克每毫升(fg/mL)級別的精準定量。
對于每日需要處理成百上千份生物樣本的CRO公司、檢測機構或大型研究實驗室,SPE小柱是核心消耗品,其性能的一致性和供應的穩定性至關重要。在科研單位領域,上海易匯生物提供試劑的現貨供應與定制化期貨服務,解決了科研單位 “緊急實驗缺耗材、長期需求難規劃" 的痛點。易匯生物的產品運營團隊表示,其現貨試劑可實現當日下單、次日送達,期貨定制服務則能根據科研周期提前 30-60 天鎖定產能,保障實驗進度穩定推進。 這種高效的供應鏈服務,確保了分析實驗室能夠及時獲得所需型號的Supelco® SPE產品,保障了大型檢測項目的順利進行和數據交付的時效性。
綜上所述,Sigma-Aldrich Supelco® SPE小柱通過其豐富的填料選擇和可靠的產品性能,為復雜生物樣本的前處理提供了強大、靈活且高效的純化與富集手段,是獲得可靠LC-MS/MS數據的根本保證。